研究表明益華乳酸菌素具有保護腸道黏膜，有效地、選擇性的抑殺機體內致病性大腸桿菌、沙門氏菌為代表的革蘭氏陰性菌，以及金黃色葡萄球菌為代表革蘭氏陽性致病菌，以及改善應激等功能。同時可增強消化能力。但在牛奶上缺乏相關試驗驗證。本試驗希望通過在奶牛日糧中添加益華乳酸菌素，研究其對奶牛采食量、產奶量、乳成分、血液代謝等指標的影響，為益華乳酸菌素對奶牛生產性能的影響提供一定的理論數據。

1材料與方法

1.1試驗動物及試驗設計

在石家莊靈壽某奶牛場選取108頭健康的中國荷斯坦泌乳奶牛進行試驗。試驗采用隨機對照試驗設計，即根據泌乳天數（102.8±61.35天）、產奶量（34.48±3.79天）、胎次（1.2±0.41胎）相近的原則，將108頭泌乳牛隨機分成三組，每組36頭牛，即處理組A組、B組和對照組C組，，試驗A組（基礎日糧＋200g益華乳酸菌素），試驗B組（基礎日糧＋100g益華乳酸菌素），對照C組（基礎日糧），預飼期5天，正式期30天。

試驗用益華乳酸菌素：由益華河北生物科技有限公司提供。本次試驗用益華乳酸菌素為益華反芻專用乳酸菌素。

1.2日糧組成與飼養管理

試驗期選擇在7月21日至8月25日。試驗前，三組泌乳牛均飼喂對照組的基礎日糧至少2周。進入試驗期后，對照組日糧不變，處理組飼喂添加了益華乳酸菌素的日糧。牛場參照 NRC（2001）奶牛飼養標準配制基礎日糧，見表1與表2。

試驗奶牛單槽飼喂, 每日分別于07: 00、14: 00和21: 30 飼喂3 次，自由采食, 自由飲水, 采用管道式擠奶機擠奶，時間為06: 00、13: 00 和21: 00。

表1 奶牛日糧配方及營養成分

表2 奶牛精料配方

注：每kg預混料含量：維生素A 800 kIU，維生素D₃ 600 kIU，維生素E 4 kIU，貼1200mg，銅1600 mg，鋅800 mg，錳 3500 mg，碘120 mg，硒70 mg，鈷80 mg等。

1.3樣品采集與測定

1.3.1采食量的測定

正式期內每10天連續3天測定三組試驗牛的群體采食量，計算個體平均采食量。

1.3.2飼料樣品采集

正式期內每換一次飼料配方采集一次飼料樣品，包括精料混合料、各種粗飼料以及剩料，每次采集的飼料樣品烘干后粉碎過1mm標準篩，根據AOAC（1997）分析方法測定DM（105℃）、CP、EE、NDF、ADF和粗灰分含量。

1.3.3奶樣的采集

預飼5天后采集奶樣進行DHI測定。正式期每天記錄奶牛產奶量。試驗組和對照組的所有108頭奶牛正式期的10、20、30天分別做DHI測定，測定成分包括體細胞數（SCC）、乳脂率、乳蛋白率、乳糖率、尿素氮。

1.3.4血樣的采集

正式期10、20、30天時于晨飼前奶?？崭?，從每組中選擇5頭試驗牛，進行尾靜脈采血，每頭牛采10mL，一份1%肝素抗凝，離心血漿，一份立即離心血清，-20℃冷凍保存。

測定指標包括

（1）抗氧化性能：超氧化物歧化酶（SOD）、谷肌甘膚過氧化物酶（GSH-Px）乳酸脫氫酶(LDH)和丙二醛(MDA)；

（2）能氮代謝和熱應激：血漿尿素氮（BUN）、非酯化脂肪酸(EFA)、血清總蛋白(TP)和白蛋白、球蛋白、T3、T4。

1.3.5體況評分、糞便評分、體溫的測定

正式期的10、20、30天，請三個經過培訓的人員對所有奶牛進行一次體況評分，結果取平均值，5分制。

采用五分制，每周日對全群牛進行糞便評分，并拍照。

使用獸用溫度計，在奶牛直腸停留3～5 min后取出，讀數記錄為直腸溫度。

1.3.6環境溫濕度測定

每天中午2點監測并記錄環境高溫度和相對濕度，并計算牛舍環境溫濕指數(ambient temperature-humidity index，THI)。

2 數據處理

本試驗數據采用SPSS軟件的數據分析功能進行數據匯總和分析, 試驗數據用平均值±標準誤表示。

3 結果及分析

3.1牛舍溫熱環境

試驗期牛舍溫熱環境數據見表3。由表3可知，無論是預飼期還是正式期，在各測定時間點奶牛牛舍的氣溫均在27.86℃以上。研究表明，一般奶牛最適宜的溫度為12℃-14℃，懷孕奶牛與泌乳奶牛最適宜的溫度為 16℃-20℃，當溫度超過24℃時，奶牛就會發生熱應激反應。溫濕指數（Temperature and humidity index,THI）在69以上，荷斯坦奶牛即處于熱應激狀態，本試驗中THI均在90以上，可見試驗環境已對試驗牛只構成了嚴重熱應激，此時奶牛會出現奶牛體溫升高，呼吸急促（氣喘），分泌過多的唾液，奶牛顯得不舒適。奶產量和繁殖力急劇降低，嚴重者?？赡芩劳?。

表3：試驗期內牛舍溫熱環境

3.2 益華乳酸菌素對奶牛生理指標的影響

直腸溫度是衡量熱應激的直觀指標。正常情況下，奶牛直腸溫度相對穩定，一般為36-38℃。該值超過正常1℃甚至更低都會影響奶牛生產性能。奶牛處于熱應激下，THI每升高1單位，直腸溫度會升高0.12℃。由表4可知，試驗奶牛均處于熱應激環境中， B組直腸溫度呈下降的趨勢，由試驗1-10天的38.86℃下降至38.52℃，下降了0.87%。試驗21-30天時，B組直腸溫度低，為38.52℃，A組高，為38.94℃，B組較A組降低了1.08%。

表4：益華乳酸菌素對奶牛直腸溫度的影響

3.3益華乳酸菌素對奶牛采食量的影響

研究表明，奶牛采食量與熱應激水平呈負相關關系，奶牛熱應激會導致奶牛采食量下降，熱應激水平越高奶牛采食量越受影響。本試驗數據也有利的證明了這一點。從表5可以看出，奶牛采食量隨著牛舍熱應激水平的變化而變化。A、B組試驗牛采食量均是先增加后降低然后又升高，而C組是先降低后上升。其中，A組試驗牛采食量由試驗前的40.92 kg/天·頭上升到試驗后期的42.28 kg/天·頭，相對升高了3.32%，在試驗16-21天時采食量達到高為45 kg/天·頭。B組試驗牛采食量試驗前與試驗后期變化不大，采食量在試驗16-21天達到高達到46.79 kg/天·頭。C組試驗牛采食量由試驗前的46.33 kg/天·頭下降到試驗后期的43.54 kg/天·頭，相對減低了6.02%。

表5：益華乳酸菌素對奶牛采食量量（鮮重）的影響

3.4益華乳酸菌素對奶牛瘤胃健康狀況的影響

根據美國密歇根州大學提出的糞便分值體系（Manure scoring system）對試驗期試驗牛糞便進行評分，見表6。通過表6可以看出，三組奶牛糞便評分均在3分，不存在差異性。糞便評分3分是高產牛群的正常值，說明試驗各組牛只瘤胃健康，同時也證明了飼喂益華乳酸菌素對奶牛瘤胃健康沒有影響。

表6：益華乳酸菌素對奶牛瘤胃健康的影響

3.5益華乳酸菌素對奶牛的體況的影響

奶牛體況評分就是對奶牛的膘情進行評定，它能反映該牛體內沉積脂肪的基本情況，一般而言，理想的泌乳牛體況評分應在2.5分~3.5分之間。由表7可知，B組在試驗期內體況評分均在3.05分，而A組由試驗前期的3.1分下降到了3.05分，C組由3.0分上升到了3.05分，但在試驗后期A、B、C組試驗牛體況評分均在3.05分，說明試驗期各組奶牛均處于理想體況狀態，益華乳酸菌素對奶牛的膘情沒有影響。

表7：益華乳酸菌素對奶牛體況的影響

3.6 益華乳酸菌素奶牛日產奶量的影響

處于熱應激環境中，奶牛受到影響的最直接反映就是產奶量的下降。由表8可知，A、B、C組奶牛平均產奶量呈逐漸下降的趨勢。A、B、C組試驗結束時平均日產奶量分別為31.08 kg、32.97 kg、31.24 kg，較試驗前7天分別降低了10.45%、3.2%、9.92%，B組日產奶量下降相對較低。在試驗21-31天，B組奶牛平均日產奶量較A、C組分別高6.08%和5.53%，可見，日糧添加100g益華乳酸菌素對緩解熱應激條件下產奶量的下降效果明顯。

表8：益華乳酸菌素對奶牛產奶量的影響

                                 kg/天

3.7 益華乳酸菌素對奶牛體細胞數的影響

體細胞（somatic cell counts，scc）指的是牛奶吞噬細胞、脫落上皮細胞、中性白細胞的總稱。當乳腺被感染或受機械損傷后，體細胞就會上升，在某種程度上體細胞數是反應乳腺感染程度的標記。研究表明，高溫和高濕條件下所引起的熱應激會引起奶牛體細胞數的增加。本試驗結果顯示（表9）：益華乳酸菌素能夠影響奶牛乳房的健康，降低體細胞數。在試驗期內，A、B組奶牛平均體細胞數均呈先增加后下降的趨勢，而C組卻呈不斷上升的趨勢。其中， A、B、C組均在試驗11-20天時平均體細胞數達到高，分別為13.08萬/ml、12.01萬/ml、22.59萬/ml，A、B組較C組分別低42.10%、46.83%，B組較A組低8.18%。試驗結束時，B組平均體細胞數低為7.99萬/ml，較A、C組分別低32%、64.07%，可見日糧添加100g益華乳酸菌素對降低奶牛體細胞數的效果好。

表9：益華乳酸菌素對奶牛體細胞數的影響

3.8益華乳酸菌素對奶牛乳成分的影響

從表10可知，奶牛飼喂益華乳酸菌素顯著影響其乳成分。試驗期，奶牛平均乳脂率呈先升高后降低的趨勢。在試驗11-20天時，A組平均乳脂率達到高為3.98%，較試驗前提高了18.45%；在1-10天時，B組平均乳脂率達到高為3.82%，較試驗前提高了4.66%；在11-20天時，C組平均乳脂率達到高為4.23%，較試驗前提高了12.5%， C組平均乳脂率較A、B組分別高6.28%（p<0.05）、13.71%（p>0.05），A、B組差異不顯著；試驗21-30天，A組平均乳脂率較試驗前7天提高了5.95%、B、C組平均乳脂率較試驗前7分別降低了3.56%、5.85%。試驗1-10天，各組平均乳蛋白率差異顯著，C組平均乳蛋白率高為3.39%，較A、B組分別高10.42%（P<0.01）、4.31%（p>0.05）；試驗21-30天，A、B、C組分別較試驗前7天分別提高了4.40%、8.28%、0.89%，可見益華乳酸菌素對提高乳脂率、乳蛋白率含量有一定的促進作用。

脂蛋白比合理的范圍是1.12-1.3，脂蛋比過低說明日糧精粗比不合理、奶牛存在酸中毒的風險，若脂蛋比過高說明奶?？焖賱佑弥敬嬖谕〉娘L險。本試驗結果顯示：飼喂復合益華乳酸菌素后，奶牛脂蛋比逐漸趨于合理范圍，但試驗21-30天，各組脂蛋比均又低于1.12，這可能與熱應激環境中牧場奶牛日糧精粗比搭配不合理造成奶牛瘤胃酸中毒有關。試驗期內，各組平均乳糖率在5.0%-5.3%范圍內，從試驗結果來看，飼喂益華乳酸菌素對奶牛乳糖率沒有影響。

乳中尿素氮含量是評估奶牛日糧的有效手段之一，在美國荷斯坦牛的尿素氮平均值為12.8 mg/dl，我國一本認為應該介于10-18 mg/dl。本試驗條件下，試驗牛乳中平均尿素氮含量均呈逐漸升高的趨勢，其中，A、B、C組平均尿素氮含量均在試驗1-10天達到高，分別為17.64 mg/d、22.42 mg/dl、18.41 mg/dl，B組較A、C組分別高27.10%（p<0.01）、21.78%（p<0.01）；試驗21-30天，A組平均尿素氮含量低為17.41 mg/dl，較B、C組分別低13.17%（p>0.05），3.43%（p<0.05），由于整個試驗期內各組奶牛尿素氮含量均處于較高水平，這對牛只繁殖存在一定的影響，因此，建議牛場及時調整日糧配方。

表10：益華乳酸菌素對奶牛乳成分的影響

注：同行肩標不同者表示差異顯著，小寫字母不同表示差異顯著（p<0.05），大寫字母不同者表示差異極顯著（p<0.01），下同。

3.9益華乳酸菌素對奶牛血液能氮代謝和熱應激指標的影響

益華乳酸菌素對奶牛血液能氮代謝和熱應激指標的影響見表11。

表11：益華乳酸菌素對奶牛血液能氮代謝和熱應激指標的影響

有研究顯示，熱應激直接影響奶牛的能量代謝，使奶牛處于能量負平衡的狀態，但血漿中游離脂肪酸水平并沒有升高。由表11可知。試驗21-30天，A組血清中FFA含量較試驗1-10天最降低了5%， B組相對降低了52.94%，而C組相對提高了7.69%?？梢?，日糧添加益華乳酸菌素能夠緩解熱應激條件下奶牛能量負平衡狀況。

本試驗結果顯示：日糧中添加益華乳酸菌素對奶牛血清中的TP、ALB、GLOB、UREA含量沒有顯著影響，但對T3、T4有一定的影響。甲狀腺素對恒溫動物調節體溫起著重要作用，T3和T4能促進機體對糖的吸收和肝糖元的分解，促使各組織對糖的利用，使機體產熱量增加。研究表明，熱應激條件下奶牛血清T3、T4均明顯下降，T3、T4的下降一方面會影響胃腸的蠕動，延長食糜的過瘤胃時間，降低采食量，另一方面會一直排乳反饋，導致產奶量的下降。本試驗條件下，試驗后A、B、C組T4水平較試驗前均升高，而血清中T3水平是先升高后降低。其中各組血清中T3水平在試驗11-20天達到高，分別為1.94 ng/ml、2.08 ng/ml、1.73 ng/ml，B組較A、C組分別高7.22%（p>0.05）、20.23%（p<0.01）；試驗21-30天，A、B、C組T3水平較試驗1-10天分別提高了18.47%、15.52%、11.11%。各組血清中T4水平在試驗11-20天達到高，其中B組高為81.01 ng/ml，較A、C組分別高12.02%（p>0.05）、22.26%（p>0.05），A組較B組高9.15%（p>0.05），試驗21-30天，A、B、C組T4水平較試驗1-10天分別提高了18.87%、5.84%%、13.12%?？梢?，日糧添加200g益華乳酸菌素對奶牛調節體溫、緩解熱應激的效果好。

3.10益華乳酸菌素對奶?？寡趸阅艿挠绊?/span>

益華乳酸菌素對奶牛血液抗氧化性能指標的影響見表12。乳酸脫氫酶（LDH）是一種糖酵解酶，能夠催化乳酸脫氫生成丙酮酸，該指標往往用于反映肝功能是否出現異常。由表12可知，各組LDH含量均呈逐漸升高的趨勢，在試驗21-30天時達到高，其中C組高為1412.40 U/L，較A、B組分別高30.01%（p>0.05）、27.84%（p>0.05）。谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px) 是機體內廣泛存在的一種重要的過氧化物分解酶，它可以清除由活性氧和H₂O₂誘發的脂質過氧化物，保護細胞膜結構和功能的完整性，本試驗中A、B組血清中GSH-px含量呈逐漸下降的趨勢，但C組呈逐漸上升的趨勢，在試驗21-30天，C組血清中GSH-px含量達到68.00 U/L，比A、B組分別高9.68%（p>0.05），61.90%（p>0.05），B組比A組低32.26%（p>0.05）。

丙二醛（MDA）是多不飽和脂肪酸的最終氧化產物，MDA生成增多會導致組織蛋白和功能改變，超氧化物歧化酶（SOD）是廣泛存在于機體內的一種金屬酶，是機體的主要的抗氧化物質，有研究表明，當機體防御機能降低時，SOD會降低，MDA會明顯升高。在本試驗條件下，各組血清中SOD含量差異不顯著，含量均在11-12 U/ML，A、B組血清中MDA含量呈逐漸降低的趨勢，而C組呈逐漸升高的趨勢，在試驗21-30天，C組血清中MDA含量高為4.78nmol/ml，比A、B組分別高66.55%（p>0.05）、83.85%（p>0.05）。

3.11 經濟效益分析

本試驗期間，奶牛TMR飼喂成本為1.21元/kg·天·頭，益華乳酸菌素為0.01元/g，乳企收購奶價為3.6元/kg，試驗后各組奶牛養殖經濟效益見表13。

表13：益華乳酸菌素對奶牛養殖經濟效益的影響

由表13可知，試驗期后B組每天牛盈利為正值，A組與C組均為負值，可見在本試驗條件下，日糧添加100克益華乳酸菌素奶牛養殖經濟效益好，達到每天每頭牛盈利2.57元。

4、結論

4.1 奶牛日糧添加益華乳酸菌素能夠降低奶牛直腸溫度、提高采食量從而緩解奶牛熱應激效應。在本試驗中，日糧添加100克益華乳酸菌素，的B組奶牛直腸溫度由試驗1-10天的38.86℃下降至38.52℃，下降了0.87%。日糧添加200克益華乳酸菌素的A組試驗牛采食量相比試驗前升高了3.32%。

4.2本試驗條件下，奶牛日糧添加益華乳酸菌素能夠有效降低體細胞數、緩解熱應激條件下奶牛產奶量的下降，從而提高日產奶量。本試驗條件下，日糧添加100克益華乳酸菌素效果好。

4.3本試驗條件下，添加益華乳酸菌素能夠提高血清T3、T4水平含量，降低血清MDA水平含量，可見益華乳酸菌素對緩解奶牛熱應激起到了積極的作用。

4.4本試驗條件下，添加益華乳酸菌素能夠提高奶牛養殖經濟效益，其中以日糧添加100克益華乳酸菌素效果好，每天每頭牛增加經濟效益達2.57元。